CM 약이온-교환막 크로마토그래피

SP 강한 양이온 교환 막 크로마토그래피 제품 소개 

 

2. 제품의 장점

빠르고 효율적 기존 수지 크로마토그래피보다 최대 40배 빠른 유속으로 높은 결합 용량을 달성할 수 있습니다. 기존 수지- 기반 크로마토그래피와 비교하여 멤브레인 크로마토그래피를 사용하면 처리 시간이 30~40배 단축될 수 있습니다. 일반적인 작동 유량은 약 10MV/min입니다.

2.2 높은 결합 효율 멤브레인 크로마토그래피는 낮은 압력 강하에서 높은 결합 능력과 높은 유속을 나타내므로 충전된 생체 분자가 모듈을 한 번 통과하여 캡처할 수 있습니다.

2.3 확장성 및 유연성 다양한 멤브레인 크로마토그래피 제품은 공정 개발부터 대규모 생산에 이르기까지 다양한 응용 분야를 포괄하여 생체분자 정제에 대한 다양한 요구 사항을 충족할 수 있습니다.- 캡슐 디자인은 일회용-사용이 가능하거나 적절한 세척 절차를 거친 후 세척하고 재사용할 수 있습니다.

2.4 생산성 향상 컴팩트한 디자인으로 시설 면적을 최소화합니다. 컬럼 패킹, 세척, 세척 검증, 컬럼 보관 등의 작업을 제거함으로써 상대적으로 적은 양의 버퍼를 사용하여 간단한 평형화 후 처리를 시작할 수 있습니다. 컬럼 패킹, 세척, 보관이 필요 없기 때문에 인건비를 50% 이상 절감할 수 있습니다.

 

 

3개의 기술적인 매개변수

3.1 구조재료

	실험실 규모	소규모	파일럿 규모	생산 규모
막 부피	0.2ml	5ml	140ml	5L
멤브레인 지지 구조	폴리프로필렌
멤브레인 하우징	폴리프로필렌
O링	실리콘

3.2 작동 특성

	실험실 규모	소규모	파일럿 규모	생산 규모
막 부피	0.2ml	5ml	400ml	5L
권장유량	1-6ml/분	25-150ml/분	2-12L/분	25-150L/분
최대 작동 온도	35도
최대 작동 압력	3bar(25도)
최대 압력차	3bar(25도)
보관 조건	20% e탄올a의문의s해결책

비교 결과, SP 멤브레인 크로마토그래피의 서비스 수명은 SP Sepharose 6FF의 서비스 수명과 비슷하다는 것을 알 수 있습니다.

그림 1. 리소자임으로 테스트한 여러 사용 후 SP 멤브레인 크로마토그래피의 결합 용량 변화

또한, 우리는 숙주 세포 단백질과 핵산을 제거하는 효율성에 대해 막 크로마토그래피를 평가했습니다. 결과는 다음과 같습니다.

	DNA				HCP
	IgG 회수	RT PCR에 의한 함량(IgG의 pg/mg)		제거 계수	함량(IgG의 ng/mg)(Elisa 제공)		제거 계수
달리다	%	Q 멤브레인 이전	Q 멤브레인 이후	통나무	Q 멤브레인 이전	Q 멤브레인 이후	통나무
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

표 1. SP 멤브레인 크로마토그래피를 사용한 CHO-발현 IgG 물질의 DNA 및 숙주 세포 단백질 제거율

일련의 실험을 통해 SP 멤브레인 크로마토그래피는 표적 IgG의 높은 회수율을 유지하면서 오염 물질을 효과적으로 제거할 수 있음이 입증되었습니다.

Gudiling SP 막 크로마토그래피를 수입 브랜드와 비교할 때 결합력 데이터는 다음과 같습니다.

제본c능력 (mg/mL)	사르토리우스	물리다	인도하는
라이소자임	25	32	29
트립신	22	27	25

표 2. 당사 제품 및 경쟁 브랜드 내 다양한 ​​단백질의 결합 용량 성능

전반적인 평가에 따르면 당사의 제본 능력은 수입 제품과 비슷합니다.

그림 2. 라이소자임을 표준으로 사용한 SP 멤브레인 크로마토그래피 모듈의 결합력 테스트

동적 결합력 및 수입 제품과 비교하여 lysozyme을 190 mM NaCl에서 용출하는 경우 대부분의 목적 단백질을 포획할 수 있음을 확인했습니다.

다양한 용출 조건을 통해 우리는 막 크로마토그래피의 용출 프로파일이 아가로스 젤의 용출 프로파일과 유사하지만 단백질의 순도는 염 농도에 따라 크게 다르다는 것을 발견했습니다. 실제 R&D 및 생산 과정에서 고순도의 목적 단백질을 얻기 위해서는 최적의 용출 조건을 정량적으로 결정하는 것이 필요합니다.-

 

4 일반적인 적용 사례

DNA, 바이러스 및 숙주 세포 단백질 제거

플라스미드, 바이러스, 단백질 포획 및 올리고뉴클레오티드 정제

효모 발효액에서 색소 제거 및 고용량-단백질 포획

 

5 이용절차

5.1 장비 준비 및 조립:

5.1.1: 수지 컬럼과 유사한 절차에 따라 AKTA 크로마토그래피 시스템에 막 크로마토그래피 모듈을 설치하여 흐름 방향이 모듈의 화살표 및 입구 방향과 일치하는지 확인합니다. 시스템에 안전하게 통합하려면 Luer 잠금 장치 또는 클램프{2}} 스타일 피팅을 사용하여 모듈을 연결하세요.

5.1.2 공급 유량을 다음으로 설정합니다.5~10MV/분평형 버퍼를 사용하여 모듈의 가스를 제거하여 유출물에 기포가 없는지 확인합니다. 탈기되면 투과 배출구를 크로마토그래피 시스템에 연결합니다.

5.2:-사용 전 처리:

5.2.1:

공급 유량을 다음으로 설정합니다.5~10MV/분다음으로-전처리를 수행합니다.5MV 이상인 경우 0.5M NaOH, 막이 완전한 평형에 도달하도록 보장합니다.

5.2.2: 동일한 유량에서 다음을 사용하여 전{1}}처리를 수행합니다.5MV 이상인 경우 1M NaCl막이 완전한 평형에 도달하도록 보장합니다.

5.3 크로마토그래피 공정

5.3.1 공급 유속을 5~10MV/분으로 설정하고 막이 완전한 평형에 도달할 때까지 5MV 이상의 평형 완충액으로 막을 평형화합니다.

5.3.2 0.22 μm 사전 여과 후- 샘플 로딩이 완료되거나 크로마토그래피 결합 용량에 도달할 때까지 샘플을 멤브레인에 로딩합니다.

5.3.3 UV 신호가 기준선으로 돌아올 때까지 10MV 이상의 평형 완충액으로 세척합니다.

5.3.4 공정 설계에 따라 기울기 용출 또는 단계적 용출을 적용하고, 필요에 따라 분획을 수집한다.

5.4 CIP 포스트-처리 사용 – 멤브레인 크로마토그래피 장치 CIP(제자리 세척)

5.4.1 공급 유량을 5~10MV/분으로 설정하고 UV 신호가 기준선 아래로 감소할 때까지 10MV 이상 동안 1M NaOH로 세척을 수행합니다.

5.4.2 30분 동안 순환시킨 후 pH가 7~8에 도달할 때까지 물 세척으로 전환하고 전도도가 거의 일정해질 때까지 20% 에탄올로 계속 세척합니다.

5.5 막 크로마토그래피 보관

CIP 사용 및 완료 후 멤브레인 모듈을 제거하여 20% 에탄올에 담가 보관하거나-20% 에탄올이 포함된 용액에 실온에서 보관할 수 있습니다. 20% 에탄올 용액은 정기적으로 검사하고 교체해야 합니다.

 

6. 주문정보

Q 강한 음이온 교환 막 크로마토그래피 캡슐 필터

	실험실 규모	소규모	파일럿 규모	생산 규모
제품 모델	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
막 부피	0.2ml	5ml	400ml	5L

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