Q 강한 음이온 막 크로마토그래피

 

2. 제품의 장점

2.1 빠르고 효율적인 -은 기존 수지보다 최대 40배 빠른 유속으로 높은 결합 용량을 달성합니다. 충전층 크로마토그래피와 비교하여 막 크로마토그래피를 사용한 처리 시간은 30~40배 단축됩니다. 일반적인 작동 유량은 10MV/min입니다.

2.2 높은 결합 효율 - 막 크로마토그래피는 낮은 압력 강하 조건에서 높은 로딩 용량과 높은 유속을 나타내므로 전하를 띤 생체분자를 단일 통과로 포착할 수 있습니다.

2.3 확장성 및 유연성 - 멤브레인 크로마토그래피 제품 전체 시리즈는 공정 개발부터 대규모 생산까지 모든 단계를 포괄하여 생체 고분자 정제의 다양한 요구 사항을 충족할 수 있습니다.- 캡슐-형 구조 설계로 일회용-사용과 세척 후 재사용을 모두 지원합니다.

2.4 생산성 향상 - 컴팩트한 디자인으로 시설 공간을 최소화합니다. 컬럼 패킹, 세척, 세척 검증 및 컬럼 보관 작업을 제거함으로써 공정에 평형화를 위한 버퍼가 덜 필요하며 컬럼 준비 없이 직접 수행할 수 있습니다. 인건비를 최대 50%까지 절감할 수 있습니다.

 

3. 기술적인 매개변수

3.1 구조재료

	실험실 규모	소규모	파일럿 규모	생산 규모
막 부피	0.2ml	5ml	140ml	5L
막 지지 구조:	폴리프로필렌(PP)
멤브레인 하우징	폴리프로필렌(PP)
O링	실리콘

 

3.2 작동 특성

	실험실 규모	소규모	파일럿 규모	생산 규모
막 부피	0.2ml	5ml	400ml	5L
권장유량	1-6ml/분	25-150ml/분	2-12L/분	25-150L/분
최대 작동 온도	35도
최대 작동 압력	3bar(25도)
최대 압력차	3bar(25도)
보관 조건:	20% 에탄올 수용액

 

Q 멤브레인 크로마토그래피의 수명은 아가로스 겔 크로마토그래피의 수명과 비슷합니다.

 

 

그림 1. BSA가 모니터링한 다중 사용 후 멤브레인 크로마토그래피 로딩 용량의 변화

또한, 우리는 숙주 세포 단백질과 핵산에 대한 막 크로마토그래피의 제거 효율을 평가했습니다. 결과는 다음과 같습니다.

	DNA				HCP
	IgG 회수	RT PCR에 의한 함량(IgG의 pg/mg)		제거 계수	함량(IgG의 ng/mg)(Elisa 제공)		제거 계수
달리다	%	Q 멤브레인 이전	Q 멤브레인 이후	통나무	Q 멤브레인 이전	Q 멤브레인 이후	통나무
1	96.7	423	1.2	2.55	7	4.8	0.16
2	97.4	438	1.3	2.53	7	4.9	0.15
3	94.7	513	1.3	2.60	6	1.9	0.50
4	95	32	0.9	1.55	6	4.2	0.15
5	96.3	45	1.1	1.61	8	5.2	0.19
6	96.5	158	0.7	2.35	8	6.2	0.11
7	96.4	267	1.9	2.15	9	7.2	0.10
8	96.8	298	2.3	2.11	9	8.2	0.04
9	97.1	746	1.5	2.70	4	2	0.30
10	96.6	39	1	1.59	4	1.5	0.43

표 1. Q 막 크로마토그래피를 사용한 CHO-발현 IgG 물질의 DNA 및 숙주 세포 단백질 제거율

 

일련의 실험을 통해 Q 막 크로마토그래피가 높은 목표 IgG 회수율을 유지하면서 불순물을 효과적으로 제거할 수 있음이 입증되었습니다.

또한, Gudiling 막 크로마토그래피를 수입 브랜드와 비교한 결과 로딩 용량 데이터는 다음과 같습니다.

적재용량(mg/ml)	사르토리우스	물리다	인도하는
BSA	29	60	45
잔디	25	40	35
단백질 A	27	45	40
트립신	30	56	44

표 2. 당사 제품과 경쟁사 제품의 다양한 단백질 로딩 성능

종합적인 평가를 보면 우리의 적재 용량이 수입 제품과 비슷하다는 것을 알 수 있으며,

그림 2.Q 막 크로마토그래피 모듈을 사용하여 BSA를 표준 단백질로 사용하여 결합 능력을 평가했습니다. 동적 결속력을 수입제품과 비교하였습니다. 결과는 대부분의 표적 단백질이 포획되어 용출될 수 있음을 보여주었습니다.150mM NaClBSA를 모델 단백질로 사용할 때.

다양한 용출 조건을 통해 우리는 멤브레인 크로마토그래피의 용출 거동이 아가로스 겔 크로마토그래피의 용출 거동과 유사하다는 것을 발견했습니다. 다양한 염 농도에서 용리된 단백질의 순도는 크게 다릅니다. 실제 공정 개발 및 생산에 있어서 고순도의 목적 단백질을 얻기 위해서는 최적의 용출 조건을 정량적으로 결정하는 것이 필요합니다.

 

4. 일반적인 적용 사례

DNA, 바이러스, 숙주 세포 단백질(HCP) 및 내독소 제거

플라스미드, 바이러스, 단백질 캡처 및 올리고뉴클레오티드 정제

 

5. 운영절차

5.1:장비 준비 및 조립:

5.1.1:AKTA 크로마토그래피 시스템: 충전 컬럼과 유사한 방식으로 막 크로마토그래피 모듈을 설치합니다. 모듈의 화살표 방향이 공급 흐름 방향과 일치하는지 확인하십시오. Luer 커넥터 또는 Tri{3}}Clamp 피팅을 사용하여 시스템을 연결합니다.

5.1.2 입구 유량을 5~10MV/min으로 설정하고 평형 버퍼를 사용하여 시스템에서 공기를 제거합니다. 배출구 흐름에 기포가 없는지 확인한 후 투과물 배출구를 크로마토그래피 시스템에 연결합니다.

5.2:-사용 전 처리:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV로 멤브레인이 평형에 도달하도록 합니다.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV로 멤브레인이 평형에 도달하도록 합니다.

5.3 크로마토그래피 공정

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >막이 평형에 도달할 때까지 5MV.

5.3.2 샘플을 0.22μm 필터를 통해 사전{1}여과한 후 전체 샘플이 적용되거나 크로마토그래피 결합 용량에 도달할 때까지 컬럼에 로드합니다.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >UV 신호가 기준선으로 떨어질 때까지 10MV.

5.3.4 설계된 프로토콜에 따라 기울기 또는 선형 용출을 수행하고 필요에 따라 분획을 수집합니다.

5.4 CIP-사용 후 처리 – 막 크로마토그래피 장치 CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >UV 신호가 기준선 아래로 떨어질 때까지 10MV.

5.4.2 30분 동안 순환시킨 후 pH가 7~8에 도달할 때까지 물 세척으로 전환한 다음 20% 에탄올로 전환하고 전도도가 안정될 때까지 계속 세척합니다.

5.5, 멤브레인 크로마토그래피 저장:

CIP 사용 및 완료 후 멤브레인 모듈을 분해하여 20% 에탄올에 보관하거나 실온에서 20% 에탄올에 온라인으로 보관할 수 있습니다. 에탄올 용액은 주기적으로 교체하고 점검해야 합니다.

 

6. 주문정보

Q 강음이온-교환막 크로마토그래피 캡슐 필터

	실험실 규모	소규모	파일럿 규모	생산 규모
제품 모델	IEXQ0002ES	IEXQ0050ES	IEXQ0400ES	IEXQ5000ES
막 부피	0.2ml	5ml	400ml	5L

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