SP 강한 양이온 교환 막 크로마토그래피

CM 약이온-교환막 크로마토그래피 제품 소개

 

1. 개요

CM 약양이온-교환 크로마토그래피는 카르복시메틸 그룹이 막에 결합되어 기능성 모듈을 형성하는 정제 기술입니다. 다양한 생체분자의 전하 특성과 전하 밀도의 차이를 바탕으로 분리가 이루어집니다. 대부분의 생물학적 거대분자는 카르복실기 또는 수산기를 포함하기 때문에 완충 용액의 pH 값을 변경하여 전하 특성과 크기를 조정할 수 있습니다. 생체분자가 반대 전하를 띠는 막 모듈에 결합한 후 이동상의 이온 강도나 pH를 변경하여 용출이 수행됩니다. 결합력이 약한 분자가 먼저 용리되고, 결합력이 강한 분자가 나중에 용출되므로 효과적인 분리가 가능합니다.

 

2. 제품의 장점

2.1 빠르고 효율적: 기존 수지- 기반 크로마토그래피보다 최대 40배 빠른 유속으로 높은 결합 용량을 얻을 수 있습니다. 기존의 충전{4}}층 크로마토그래피와 비교하여 멤브레인 크로마토그래피는 처리 시간을 30~40배 단축할 수 있습니다. 일반적인 작동 유량은 10MV/min입니다.

2.2 높은 결합 효율성: 멤브레인 크로마토그래피는 낮은 압력 강하 조건에서 높은 로딩 용량과 높은 유속을 보여 주므로 모듈을 한 번 통과하여 충전된 생체 분자를 캡처할 수 있습니다.

2.3 확장성 및 유연성: 전체 멤브레인 크로마토그래피 제품은 공정 개발부터 대규모 제조에 이르기까지 다양한 생체거대분자 처리 요구사항을 충족할 수 있습니다.- 캡슐 디자인은 일회용- 용도로 사용하거나 필요에 따라 세척하고 재사용할 수 있습니다.

2.4 생산성 향상: 컴팩트한 디자인으로 시설 공간을 최소화합니다. 컬럼 패킹, 세척, 세척 검증 및 컬럼 보관 단계를 제거함으로써 상대적으로 적은 양의 버퍼로 평형화 후 처리를 시작할 수 있습니다. 컬럼 패킹, 세척, 보관이 필요 없어 인건비를 최대 50% 이상 절감할 수 있습니다.

 

3개의 기술적인 매개변수

3.1 구조재료

	실험실 규모	소규모	파일럿 규모	생산 규모
막 부피	0.2ml	5ml	140ml	5L
멤브레인 지지 구조	폴리프로필렌
멤브레인 하우징	폴리프로필렌
O링	실리콘 고무

3.2 작동 특성

	실험실 규모	소규모- 규모	파일럿- 규모	생산 규모
막 부피	0.2ml	5ml	400ml	5L
권장유량	1-6ml/분	25-150ml/분	2-12L/분	25-150L/분
최대 작동 온도	35도
최대 작동 압력	3bar(25도)
최대 압력차	3bar(25도)
보관 조건	20% 에탄올 수용액

기존 미디어와 비교하여 CM 멤브레인 크로마토그래피의 사용 수명은 CM 아가로스 겔 6FF의 수명과 비슷합니다.

그림 1. 리소자임 테스트에서 여러 번 사용한 후 CM 막 크로마토그래피의 로딩 용량 변화.

또한 막 크로마토그래피를 통해 숙주 세포 단백질과 핵산의 제거 효율을 평가했습니다. 결과는 아래와 같습니다.

표 1. CM 막 크로마토그래피를 사용한 CHO-발현 IgG 물질의 DNA 및 숙주 세포 단백질 제거율

일련의 실험을 통해 CM 멤브레인 크로마토그래피가 표적 IgG의 높은 회수율을 유지하면서 오염 물질을 효과적으로 제거할 수 있음이 입증되었습니다.

	DNA				HCP
	IgG 회수	RT PCR에 의한 함량(IgG의 pg/mg)		제거 계수	함량(IgG의 ng/mg)(Elisa 제공)		제거 계수
달리다	%	Q 멤브레인 이전	Q 멤브레인 이후	통나무	Q 멤브레인 이전	Q 멤브레인 이후	통나무
1	96.7	423	6.9	1.79	7	6.1	0.06
2	97.4	438	5.8	1.88	7	4.8	0.16
3	94.7	513	9.6	1.73	6	3.6	0.22
4	95	32	4.6	0.84	6	4.7	0.11
5	96.3	45	4.6	0.99	8	5.1	0.20
6	96.5	158	8.2	1.28	8	4.6	0.24
7	96.4	267	6.5	1.61	9	6.8	0.12
8	96.8	298	5	1.78	9	7.4	0.09
9	97.1	746	5.6	2.12	4	3.5	0.06
10	96.6	39	5	0.89	4	3.9	0.01

Gudiling CM 막 크로마토그래피를 사용하여 다른 브랜드와 비교한 로딩 용량 데이터는 다음과 같습니다.

로딩 용량(mg/mL)	징뱌오 1	인도하는
라이소자임	18	23
트립신	17	20

표 2. 경쟁사 제품과 비교한 당사 제품의 다양한 단백질 로딩 성능

전반적인 평가에 따르면 당사의 적재 용량은 수입 제품과 비슷합니다.

그림 2. 라이소자임을 표준 단백질로 사용한 CM 막 크로마토그래피 모듈의 로딩 용량 테스트.

동적 적재 능력도 수입 제품과 비교했습니다. 검증 결과, 대부분의 표적 단백질을 효율적으로 포획할 수 있는 160mM NaCl을 사용하여 리소자임이 용출될 수 있음이 나타났습니다.

다양한 용출 조건의 최적화를 통해 우리는 막 크로마토그래피가 아가로스 겔 크로마토그래피와 유사한 용출 거동을 나타내는 것을 발견했습니다. 여기서 단백질 순도는 다양한 염 농도에 따라 크게 달라집니다. 실제 R&D 및 생산에 있어서 고순도의 목적 단백질을 얻기 위해서는 평형 용출 조건을 정량적으로 결정하는 것이 필요합니다.-

 

4. 대표적인 적용사례

• DNA, 바이러스, 숙주세포 단백질 제거
• 플라스미드, 바이러스, 단백질 캡처 및 올리고뉴클레오티드 정제
• 효모 발효액의 탈색 및 고용량-단백질 포집

 

5. 운영 절차 / 작업 흐름

5.1:장비 준비 및 조립:

5.1.1: AKTA 크로마토그래피 시스템에 막 크로마토그래피 모듈 설치 설치 방법은 포장-층 크로마토그래피 매체와 유사합니다. 흐름 방향이 모듈에 표시된 화살표를 따르는지 확인하십시오. 모듈은 Luer 커넥터 또는 클램프 커넥터를 사용하여 연결할 수 있습니다.

5.1.2 입구 유량을 5~10MV/min으로 설정하고 평형 버퍼를 사용하여 모듈에서 공기를 제거합니다. 배출구에서 기포가 관찰되지 않을 때까지 계속 세척한 다음 투과 배출구를 크로마토그래피 시스템에 연결합니다.

5.2.:사용 전-준비

5.2.1: 입구 유속을 5~10MV/분으로 설정하고 0.5M NaOH를 사용하여 5MV 이상 전처리를 수행하여 멤브레인이 평형에 도달하도록 합니다.

5.2.2: 동일한 유속 조건에서 1M NaCl로 5MV 이상 전{1}}처리를 수행하여 멤브레인이 평형에 도달하도록 합니다.

5.3. 크로마토그래피 공정

5.3.1 입구 유속을 5~10MV/분으로 설정하고 막이 평형에 도달할 때까지 평형 완충액으로 5MV 이상의 전처리를- 수행합니다.

5.3.2 0.22μm 사전 여과 후-샘플을 컬럼에 로드하고 전체 샘플이 적용되거나 크로마토그래피 로딩 용량에 도달할 때까지 계속합니다.

5.3.3 UV 값이 기준선으로 감소할 때까지 10MV 이상의 평형 완충액으로 세척합니다.

5.3.4 공정 설계에 따라 기울기 용출 또는 선형 용출 시스템을 적용하고 필요에 따라 분획을 세그먼트로 수집합니다.

5.4 CIP 사용 후 처리 – 막 크로마토그래피 시스템용 CIP(Clean-in-).

5.4.1 입구 유속을 5~10MV/분으로 설정하고 UV 값이 기준선 아래로 떨어질 때까지 10MV 이상 1M NaOH로 처리합니다.

5.4.2 30분 동안 순환 세척한 후 pH가 7~8이 될 때까지 물로 헹구고 20% 에탄올로 전환하여 전도도가 거의 변하지 않을 때까지 세척을 계속합니다.

5.5멤브레인 크로마토그래피 보관

CIP 사용 및 완료 후 멤브레인 모듈을 제거하여 20% 에탄올에 담가 보관하거나 20% 에탄올이 포함된 용액에 실온에서 온라인으로 보관할 수 있습니다. 20% 에탄올 용액은 정기적으로 검사하고 교체해야 합니다.

 

6, 주문 정보

CM-형 약한 양이온 교환막 크로마토그래피 캡슐 필터

	실험실 규모	소규모	파일럿 규모	생산 규모
모델	IEXCM0002ES	IEXCM0050ES	IEXCM0400ES	IEXCM5000ES
막 면적	0.2ml	5ml	400ml	5L

인기 탭: sp 강한 양이온 교환 막 크로마토그래피, 중국, 공급 업체, 제조업체, 공장, 도매, 대량, 재고 있음, 무료 샘플