한외여과관의 유지보수 및 사용방법

한외여과관의 유지보수 및 사용방법

한외 여과 관의 기능:

1) 농도; 2) 탈염; 3) 버퍼를 교체하십시오. 4) 부분 정화의 효과가 있다.

1. 새로운 한외 여과 튜브는 다른 치료없이 직접 사용할 수 있습니다.

2. 한외 여과 관은 고열에서 살균될 수 없다;

3. 농축 단백질을 바꿀 때 한외 여과 튜브의 처리

한외여과 튜브는 재사용할 수 있습니다. 1-2 시간 동안 0.1M NaOH에 담그고 물로 씻은 다음 새로운 단백질을 농축하는 데 사용할 수있는 원심 분리기 상에서 관련 용액 (멸균수 또는 PBS)으로 3 회 세척하십시오.

4. 일반적으로 배치 된 한외 여과 튜브의 처리

자주 사용되는 한외 여과 튜브의 경우 0.1M NaOH에 1-2 시간 동안 담그고 물로 씻은 다음 멸균수에 담그십시오. 필터 멤브레인을 젖은 상태로 유지하고 박테리아가 자라지 않도록하십시오.

5. 한외여과 관의 처리 장시간 두어졌습니다

한외여과 튜브를 장시간 사용하지 않으면 0.1M NaOH에 1-2 시간 동안 담그고 물로 씻은 다음 20 % 에탄올에 담가 보관하십시오. 필터 멤브레인을 젖은 상태로 유지하고 박테리아가 자라지 않도록하십시오.

6. 한외여과 관을 위해 이용되는 원심 속도

원심 속도는 일반적으로 4000rpm입니다 (일반적으로 3000g이 권장되며 최대 4000g을 초과 할 수 없음). 5-8분 동안 원심분리한 후, 4ml 샘플을 1ml 내지 수십 마이크로리터 미만으로 농축할 수 있고; 속도가 너무 높으면 표적 단백질이 떨어져 표적 단백질의 손실을 초래합니다. 저속, 시간 소모적 및 낮은 작업 효율성;

7. 총 머리가 한외 여과 튜브로 확장 될 때주의 사항

한외여과 튜브에 단백질 용액 또는 버퍼를 첨가 할 때, 블루 건 헤드를 사용할 수 있습니다. 그러나, 농축된 표적 단백질이 한외여과 튜브의 바닥으로부터 흡수될 때, 노란 총 헤드가 사용되어야 한다; 총 헤드가 한외 여과 튜브에 삽입되면 필터 멤브레인이 뚫리지 않도록 필터 멤브레인에 닿지 않도록해야합니다.

8. 한외여과 관의 단백질 흡착 손실을 감소시키십시오

한외여과 튜브의 멤브레인은 단백질을 흡착 할 수있어 표적 단백질을 약 30 % 감소시킵니다. 단백질 손실을 줄이기 위해, 표적 단백질 용액을 흡수한 후, 한외여과 튜브의 바닥을 단백질 버퍼로 퍼지하여 필터 멤브레인에 흡착된 대부분의 단백질을 세척하고 표적 단백질의 손실을 감소시키고; 정제 된 단백질이 농축 된 경우, 농축 된 부피가 너무 작아서는 안된다는 점에주의하십시오. 일반적으로, 아무리 원심분리되더라도, 약 200 μ L 단백질 용액은 바닥에 유지될 것이고;

9. 한외 여과 튜브의 고장을 정의하는 방법

정상적인 사용 하에서, 필터 멤브레인이 뚫리지 않을 때, 농축된 단백질 용액은 단백질을 포함하지 않거나 양이 매우 낮을 때(표적 단백질 포함), 첫 번째 여과된 용액은 표적 단백질을 포함하고 있는 반면, 그것은 필터 멤브레인이 유효하지 않으며 새로운 한외여과 튜브로 교체될 필요가 있음을 나타낸다.