재조합 단백질을 발현하는 효모의 정화 및 한외여과를 위한 효율적이고 저렴한 공정

외인성 유전자의 효모 발현은 재조합 단백질 및 펩타이드, 항체 및 백신, 사이토카인, 성장 인자, 호르몬 및 기타 생리 활성 물질을 생산할 수 있을 뿐만 아니라 산업용 효소, 기능성 식품 및 생물학적 재료를 생산하는 데에도 사용할 수 있어 응용 가능성이 넓습니다. .

 

효모 발현 시스템에는 일반적으로 사용되는 두 가지 발현 시스템, 즉 Saccharomyces cerevisiae 발현 시스템과 메탄영양 효모 발현 시스템이 포함됩니다. 메탄올 효모 발현 시스템은 현재 가장 널리 사용되는 효모 발현 시스템이며, 메탄올을 탄소와 에너지로 사용할 수 있는 피치아(Pichia)가 가장 일반적으로 사용됩니다. 그 밖에도 한센효모, 스파에로이데스(Sphaeroides) 등이 있다.

 

어떤 종류의 효모 발현 시스템이든 하류 분리 및 정제 공정은 유사하며 특정 공정 흐름에서는 재조합 단백질과 폴리펩티드 약물의 효모 발현을 예로 들 수 있습니다.

 

Guidling 정밀 여과 막 카세트는 개방형 흐름 채널과 접선 흐름 여과 모드를 채택하여 효모 발효액 및 대장균 분해 액체와 같은 복잡한 공급 액체를 고속으로 효과적으로 처리할 수 있으며 소규모 테스트에서 생산 규모까지 선형 증폭을 보장할 수 있습니다. 컴팩트한 모듈식 설계, 간단한 파이프라인 연결, 시스템의 독립성 및 가독성은 작업자를 보호하고 생물학적 오염을 방지할 수 있습니다. 유지 관리 및 청소 확인도 없습니다. 따라서 초기 하류 처리의 정화 단계에 매우 적합합니다.

 

UF/DF 공정의 주요 목적은 불순물을 제거하고 버퍼를 대체하는 것입니다. Guidling 한외여과막 카세트는 막 공극 크기의 우수한 균질성과 강한 친수성을 갖고 있어 막에 더 높은 유속과 더 낮은 단백질 흡착을 제공할 수 있으며, 최적화된 흐름 채널 설계, 더 작은 압력 강하, 쉬운 물질 전달 및 여과 시간을 크게 단축할 수 있습니다. 또한, 제품 시리즈는 다양한 규모의 다양한 응용 분야의 요구 사항을 충족할 수 있도록 완전하고 유연합니다. 따라서 다운스트림 가공의 UF/DF 단계에 매우 적합합니다.

 

Guidling Membrane 적용사례는 다음과 같습니다.카세트재조합 단백질의 효모 발현에서.

 

정밀여과 설명

정밀여과를 통해 1.5L 효모 발효액(목표 단백질 분자량 42-55 KD)을 정화하기 위해 {{0}}.11평방미터 0.22μm 기공 막 카세트를 사용했습니다. 정밀여과 전 과정에서 목적 단백질의 회수율, 탁도 변화, 막 유동 고갈 등을 조사하였다.

0-17min은 농축 공정이고, 17-32min은 세척 및 여과 공정입니다. 전체 정밀여과 공정 동안 TMP는 점진적으로 증가했으며 액체 유입 속도는 변하지 않았으며 평균 재료 플럭스는 45LMH였습니다.

액체의 탁도는 정밀여과 전 600NTU, 정밀여과 후 8NTU로 탁도의 변화가 뚜렷했습니다.

결과는 목적 단백질의 수율이 > 90%인 것으로 나타났습니다. Guidling Technology 0.22μm 멤브레인 카세트는 안정적이며 이 애플리케이션 시나리오에 적합합니다.

 

한외여과 농도

 

 

그 결과, 표적 단백질이 완전히 포획된 것으로 나타났다. Guidling Technology 10kd 멤브레인 카세트는 안정적으로 작동할 수 있으며 이 애플리케이션 시나리오에 적합합니다.

효모에 의해 발현된 대부분의 재조합 단백질은 고도로 발현되지 않았다. 여과된 액체의 탁도가 현저히 감소하고 단백질 회수율이 높아졌습니다. 후속 크로마토그래피 시간이 너무 길기 때문에 단백질에 악영향을 미칠 수 있습니다. 크로마토그래피 샘플링 시간을 단축하기 위해 한외여과 농축 단계를 추가할 수 있으며 샘플 후 목표 단백질을 신속하게 농축할 수 있습니다. 시간을 절약하고 필러 양을 줄여 생산 비용을 절감한다는 목적을 달성합니다.

 

Guidling Technology 미세여과 막 카세트는 일반적으로 공급액의 탁도를 20NTU 미만으로 줄여 후속 한외여과 및 크로마토그래피 요구 사항을 완전히 충족할 수 있습니다. 한외여과막 카세트의 한외여과 회수율은 재료에 따라 다르며 일반적인 회수율은 90-95%에 도달할 수 있습니다.

Guidling Technology는 관련 평가를 위한 테스트 키트 요청을 환영합니다.

 

가이들링 소개

Guidling Technology는 바이오 의약품, 세포 배양, 바이오 의약품의 정제 및 농축, 진단 및 산업용 유체에 중점을 둔 국가 첨단 기술 기업입니다. 우리는 원심분리 필터 장치, 한외여과 및 정밀여과 카세트, 바이러스 필터, TFF 시스템, 심층 필터, 중공 섬유 등을 성공적으로 개발했습니다. 이는 바이오 의약품, 세포 배양 등의 응용 시나리오를 완벽하게 충족합니다. 당사의 멤브레인 및 멤브레인 필터는 사전 여과, 미세 여과, 한외 여과 및 나노 여과의 농축, 추출 및 분리에 널리 사용됩니다. 소규모 일회용 실험실 여과부터 생산 여과 시스템, 무균 테스트, 발효, 세포 배양 등에 이르기까지 당사의 다양한 제품 라인은 테스트 및 생산 요구 사항을 충족합니다. Guidling Technology는 귀하와 협력하기를 기대하고 있습니다!