지도 기술을 통해 간단하고 효율적인 담수화 및 농축 방법을 배울 수 있습니다.
단백질은 분리, 정제 후 탈염이 필요한 경우가 많으며, 이러한 염은 주로 생체 내 다양한 이온(예: 나트륨 이온, 칼륨 이온, 염화물 이온 등)뿐만 아니라 추출물의 완충염, 실험에 사용되는 특정 변성제의 용리액, 염분 성분입니다. 고농도의 염은 단백질의 활성과 안정성은 물론 다른 분자와의 상호 작용에 영향을 미쳐 간섭 신호를 생성하거나 전기 영동, 질량 분석법 및 결정학 연구와 같은 후속 분석 방법에서 측정 정확도를 감소시킬 수 있습니다. 따라서 정제된 단백질을 분리한 후 탈염하는 작업이 매우 필요하며, 주로 사용되는 탈염 방법으로는 막(투석 및 한외여과)과 겔여과 크로마토그래피가 있다. 또한 어떤 경우에는 희석을 통해 담수화를 달성할 수도 있습니다.
투석 담수화는 주기가 길고 교체 유체가 많이 필요하기 때문에 적용이 크게 제한되어 있으며 산업에서는 덜 사용되지만 주로 실험실에서 부분적으로 사용되며 실험실도 점차 한외 여과 튜브로 대체됩니다. /한외여과 컵.
단백질의 탈염 및 농축 공정에 사용되는 주요 막분리 기술은 한외여과법이다. 한외 여과는 고효율, 낮은 에너지 소비, 상 변화 없음, 화학 시약 추가 필요 없음, 쉬운 작동, 온화한 조건, 생물학적 거대 분자의 활성을 더 잘 유지할 수 있는 능력, 높은 회수율 및 기타 장점을 갖춘 막 분리 기술입니다. , 단백질 분리 및 정제에 사용하면 독특한 장점이 있습니다.
한외 여과는 다공성 막을 분리 매체로 사용하고 막 양면의 압력 차이를 원동력으로 사용하여 용액에서 서로 다른 분자량의 물질을 분리하는 막 여과 방법으로 담수화, 농축에 중요한 역할을합니다. 그리고 정화. 이는 최근 개발된 새로운 방법으로 생물학적 거대분자, 특히 단백질과 효소의 농축이나 담수화에 가장 적합합니다. 한외여과 응용의 핵심은 막의 선택, 막의 다양한 유형 및 사양, 물 유속, 분자량 차단 및 기타 매개변수의 차이가 있으므로 관련 작업 요구에 따라 선택해야 합니다. 또한, 한외여과 장치의 형태, 용질 조성 및 특성, 용액 농도 등이 한외여과 효과에 일정한 영향을 미칩니다.
단백질 정제 공정에서 단백질을 탈염 및 농축하기 위한 한외여과 기술의 적용은 작업의 단순성, 시간 절약이라는 장점과 함께 수백에서 수천 리터에 이르는 대량의 액체를 처리하는 데 적합하다는 특징이 있습니다. , 단백질 회수율이 높습니다. 한외여과 방법은 실험실 미량 처리용 한외여과 튜브, 소량 처리용 한외여과 컵, 산업용 한외여과 시스템에서 성숙됩니다.
한외여과는 직접압력 한외여과와 접선유동여과로 세분되며, 현재 업계에서는 접선유동여과가 주로 사용되며 담수화 및 완충액 교체에 널리 사용된다.
다음은 단백질 담수화 및 농축에 Guidling Technology의 한외여과막 카세트를 적용한 예입니다.
{{0}}.11㎡ 10 kd 기공 크기 막 카세트(G01100010K)를 사용하여 PEG 변형 성장 호르몬 용액 500 mL를 0.2 mg/mL 농도로 탈염 및 농축했습니다. 한외여과 과정 전반에 걸쳐 담수화율, 단백질 회수율, 막 유량 실패 조건, 물 유량 회수율 등을 조사하였다.
사용 전후에 멤브레인 카세트의 물 유속을 별도로 테스트한 결과 동일한 공급 속도, 공급 압력 및 환류 압력을 유지한다는 전제 하에 멤브레인 카세트의 회수율이 98%에 도달했습니다.
전체 공정은 총 2L의 재료를 처리하였으며 소요시간은 40분, 농축 공정은 0-5분, 액체 교환 공정은 5-35분, 액체 교환 공정은 35-40분이었다. 과잉 집중 과정이었습니다. 한외여과 공정 전반에 걸쳐 TMP는 0.7-0.8bar 사이에서 안정화되었고 공급 속도는 일정했으며 평균 재료 플럭스는 27LMH였습니다.
2L의 물질 농축 액체를 60mL로 교환, 약 33배 농축, 담수화율은 99%에 도달, 회수율은 80%에 도달, 세척 후 액체가 50mL 증가, 총 회수율 88%, 공업 생산에 따름 파이프라인의 데드 볼륨 계산은 가능한 한 상단 세척 횟수를 늘리고 일반 상단 세척 3회를 완전히 복구할 수 있습니다.
Guidling Technology 멤브레인 카세트는 내식성이 강한 의료용 비활성 재료로 만들어졌으며 강한 알칼리 세척을 견딜 수 있습니다. 자동화된 제조 공정을 사용하면 제품의 연속성과 품질 신뢰성, 더 높은 기계적 강도, 배압 저항 및 반복 헹굼 성능이 보장됩니다. 그것은 막에 더 높은 흐름과 더 낮은 단백질 흡착을 제공할 수 있는 초친수성을 가지고 있습니다. 또한 압력 강하가 더 작은 최적화된 흐름 채널 설계를 갖추고 있어 물질 전달이 용이하고 여과 시간이 크게 단축됩니다.
당사의 멤브레인 카세트는 1kd에서 1000kd까지 광범위한 기공 크기로 제공됩니다. 그중 1-10kd 한외여과막 카세트는 담수화 및 발열물질 제거에 사용될 수 있습니다. 30kd 한외여과막 카세트는 단클론 항체 농축 및 완충액 교체에 사용할 수 있습니다. 동시에 당사의 중공 섬유 제품은 주로 백신 제품의 다양한 응용 분야에 사용되는 100kd, 300kd 및 500kd의 기공 크기를 가진 생물학적 제제의 농축 및 대체에도 사용할 수 있습니다.
Guidling Technology는 바이오 의약품, 세포 배양, 바이오 의약품의 정제 및 농축, 진단 및 산업용 유체에 중점을 둔 국가 첨단 기술 기업입니다. 우리는 원심분리 필터 장치, 한외여과 및 정밀여과 카세트, 바이러스 필터, TFF 시스템, 심층 필터, 중공 섬유 등을 성공적으로 개발했습니다. 이는 바이오 의약품, 세포 배양 등의 응용 시나리오를 완벽하게 충족합니다. 당사의 멤브레인 및 멤브레인 필터는 사전 여과, 미세 여과, 한외 여과 및 나노 여과의 농축, 추출 및 분리에 널리 사용됩니다. 소규모 일회용 실험실 여과부터 생산 여과 시스템, 무균 테스트, 발효, 세포 배양 등에 이르기까지 당사의 다양한 제품 라인은 테스트 및 생산 요구 사항을 충족합니다. Guidling Technology는 귀하와의 협력을 기대하고 있습니다!
